咨询热线
19121642062
NEWS/ 公司新闻
首页  >  公司新闻  >  illumina测序仪的测序原理是什么?

illumina测序仪的测序原理是什么?

发布时间:2020-11-09浏览:73次
  illumina测序仪是利用其核心技术“DNA簇”和“可逆性末端终结”,实现自动化样本制备及基因组数百万个碱基大规模平行测序。
  
  illumina测序原理:
  
  illumina测序采用边合成边测序技术(Sequencingbysythesis,SBS),步骤如下:
  
  步骤一:建库,在DNA的片段两端加上序列已知的通用接头构建文库,文库加载到测序芯片Flowcell。
  
  步骤二:簇生成。文库两端的已知序列与Flowcell基底上的Oligo序列互补,每条文库片段都经过桥式PCR扩增形成一个簇。
  
  步骤三:簇扩增及测序。与步骤二同时进行。即在碱基延伸过程中,每个循环反应只能延伸一个正确互补的碱基,根据四种不同的荧光信号确认碱基种类,保证最终的核酸序列质量,经过多个循环后,完整读取核酸序列。
  
  一些常用基本概念的介绍:
  
  1、flowcell是指illumina测序时,测序反应发生的位置,1个flowcell含有8条lane。
  
  2、lane每一个flowcell上都有8条泳道,用于测序反应,可以添加试剂,洗脱等等。
  
  3、tile每一次测序荧光扫描的最小单位。
  
  4、reads指测序的结果,1条序列一般称为1条reads。
  
  5、bpbasepair碱基对,用于衡量序列长度。
  
  6、双端测序只一条序列可能比较长如500bp,我们可以两端每端各测150bp。
  
  7、junction上面说的双端测序,中间会留有200bp测不到的东西,我们叫junction。
  
  8、adapter就是测序中需要的一段特定的序列,有类似于引物的功能。
  
  9、primerPCR中的引物。
扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站