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分享一下BD流式细胞仪的3大要素

发布时间:2020-11-11浏览:133次
  BD流式细胞仪是一种能够探测和计数以单细胞液体流形式穿过激光束的细胞检测装置,由于在检测中使用的细胞标志示踪物质为荧光标记物,因此,用来分离、鉴定细胞的流式细胞仪有被称为荧光激活细胞分类仪,是分离和鉴定细胞群及亚群的一种强而有力的应用工具。
 
  其原理是在一组混合的细胞群中,加入特异的针对特定靶细胞表面分子的荧光标记单克隆抗体,这种特异单克隆抗体与其对应的抗原靶分子结合,结合后的荧光标记抗体停留在特定细胞的表面,称为荧光抗体标记的靶细胞;将含有被标记细胞的混合细胞群混悬在一定容积的上样缓冲液中,再通过FACS的进样吸管孔,仪器就会将细胞悬液制成以单细胞排列的微细流束。
 

BD流式细胞仪

  BD流式细胞仪的3大要素
 
  1.流式细胞仪:现在市面上有多种型号,但其基本结构都是相同的,分析性有液流系统、光路系统、监测分析系统。
 
  (1)液流系统
 
  (2)光路系统
 
  光路系统始于激光器,其分类分法很多,常用的分类方法是根据其发射的激光的波长来分,如常见的有488nm的蓝激光器、635nm的红激光器和405nm的紫激光器,不同的激光器发出的激光照射到细胞后产生的光信号会经过不同的光路系统被不同的通道接收。
 
  采集的光信号包括散射光信号和荧光信号,散射光信号也就是我们常说的FSC、SSC;荧光信号是细胞上结合有荧光素,被激光激发以后,会发射荧光信号。
 
  (3)检测分析系统:
 
  检测分析系统就是以通道为单位将细胞的各个通道的光信号汇总分析,后得出样品群体中细胞的物理化学特征。
 
  通道,我们可以理解为就是光电倍增管,有2个作用:
 
  ①将光信号转变为电子信号;
 
  ②放大电子信号。可以分为散射光通道和荧光通道,一个激光器下可以有多个荧光通道,一个通道对应多个荧光染料。
 
  另一个重要组成部分就是计算机分析系统,例如BD的DIVA系统。
 
  二、样品细胞:流式细胞术检测的对象一般是细胞,并且是呈独立状态的悬浮于液体中的细胞,如果要检测组织中的细胞,必须先将组织制备成单细胞悬液。
 
  三、荧光偶联抗体:样品细胞只有标记荧光素偶联抗体进而被激光照射后才能发射荧光信号,从而得到样品细胞表达某抗原分子强弱等情况。
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